Análise TG-ROC de testes de imunofluorescência no diagnóstico de leishmaniose visceral canina / TG-ROC analysis of immunofluorescence assays in canine visceral leishmaniasis diagnosis

OBJETIVO: Analisar a acurácia do diagnóstico de dois protocolos de imunofluorescência indireta para leishmaniose visceral canina. MÉTODOS: Cães provenientes de inquérito soroepidemiológico realizado em área endêmica nos municípios de Araçatuba e de Andradina, na região noroeste do estado de São Paulo, em 2003, e área não endêmica da região metropolitana de São Paulo, foram utilizados para avaliar comparativamente dois protocolos da reação de imunofluorescência indireta (RIFI) para leishmaniose: um utilizando antígeno heterólogo Leishmania major (RIFI-BM) e outro utilizando antígeno homólogo Leishmania chagasi (RIFI-CH). Para estimar acurácia utilizou-se a análise two-graph receiver operating characteristic (TG-ROC). A análise TG-ROC comparou as leituras da diluição 1:20 do antígeno homólogo (RIFI-CH), consideradas como teste referência, com as diluições da RIFI-BM (antígeno heterólogo). RESULTADOS: A diluição 1:20 do teste RIFI-CH apresentou o melhor coeficiente de contingência (0,755) e a maior força de associação entre as duas variáveis estudadas (qui-quadrado=124,3), sendo considerada a diluição-referência do teste nas comparações com as diferentes diluições do teste RIFI-BM. Os melhores resultados do RIFI-BM foram obtidos na diluição 1:40, com melhor coeficiente de contingência (0,680) e maior força de associação (qui-quadrado=80,8). Com a mudança do ponto de corte sugerido nesta análise para a diluição 1:40 da RIFI-BM, o valor do parâmetro especificidade aumentou de 57,5 por cento para 97,7 por cento, embora a diluição 1:80 tivesse apresentado a melhor estimativa para sensibilidade (80,2 por cento) com o novo ponto de corte. CONCLUSÕES: A análise TG-ROC pode fornecer importantes informações sobre os testes de diagnósticos, além de apresentar sugestões sobre pontos de cortes que podem melhorar as estimativas de sensibilidade e especificidade do teste, e avaliá-los a luz do melhor custo-benefício.

OBJECTIVE: To analyze the accuracy of the diagnosis of two protocols of indirect immunofluorescence assays for canine visceral leishmaniasis. METHODS: Dogs from the seroepidemiological survey conducted in an endemic area of the cities of Araçatuba and Andradina, in Northwestern São Paulo state, in 2003, and in a non-endemic area of the metropolitan region of São Paulo, were used to assess two protocols of indirect immunofluorescence assay (IFA) for leishmaniasis: one using a Leishmania major heterologous antigen (IFA-BM) and another using a Leishmania chagasi homologous antigen (IFA-CH). Two-graph receiver operating characteristic (TG-ROC) analysis was used to estimate accuracy. TG-ROC analysis compared 1:20 dilution readings of the homologous antigen (IFA-CH), considered as reference test, with IFA-BM dilutions (heterologous antigen). RESULTS: The 1:20 dilution used in the IFA-CH test showed the best contingency coefficient (0.755) and the highest strength of association between the two variables studied (chi-square=124.3). Thus, it was considered the test reference dilution in comparisons with different IFA-BM test dilutions. The best IFA-BM results were obtained from 1:40 dilutions with the best contingency coefficient (0.680) and highest strength of association (chi-square=80.8). With the change in the cut-off point, recommended for the IFA-BM 1:40 dilution in this analysis, the specificity parameter value rose from 57.5 percent to 97.7 percent, even though the 1:80 dilution showed the best sensitivity estimate (80.2 percent), with the new cut-off point. CONCLUSIONS: TG-ROC analysis can provide important information about diagnostic tests, in addition to offering suggestions on cut-off points that can improve test sensitivity and specificity estimates and assessing these tests in terms of the best cost-benefit ratio.

Validaçäo de um novo método de isolamento de vírus rábico: prevalência do vírus rábico em morcegos albergados no Parque Estadual Intervales, Estado de Säo Paulo; estudo comparativo entre duas metodologias / Validation of a new rabies virus isolation method

O estudo de validaçäo foi realizado com uma amostra aleatória de morcegos capturados na Mata Atlântica, avaliada quanto à presença do vírus rábido por dois sistemas de cultivos celulares para o isolamento do vírus, cujos os resultados foram comparados por meio de algumas medidas indicadoras. Os indicadores para estimar a validade do novo método foram: sensibilidade, especialidade, valores preditivos positivo e negativo, e acurácia. As estimativas foram comparadas pelos seguintes métodos: Receiving Operacional Characteristics (ROC); análise gráfica exploratória pela técnica de Bland & Altman, para verificar algum viés; e técnica de Passing-Bablok, para estabelecer a linearidade entre os dois métodos e determinar o valor de nível de corte para o teste de diagnóstico, e a probabilidade de a regiäo ser uma área livre da doença ou näo. Nas duas linhagens celulares, io isolamento do vírus rábico apresentou proporçöes diferentes (6,6 por cento e 15,12 por cento). O método alternativo (célula McCoy) apresentou valores de sensibilidade e de especificidade iguais a 100 por cento, enquanto que o método de referência apresentou valores de 5,9 por cento para sensibilidade, e de 94 por cento para especificidade, quando confrontados na análise computacional pelas curvas ROC. Porém, quando avaliados individualmente, o método de referência apresentou superioridade numérica, com valores de 25 por cento para sensibilidade, e de 71,4 por cento para especificidade, enquanto que o método alternativo teve valores de 16,6 por cento e de 75,2 por cento, para sensibilidade e especicifidade, respectivamente. O estudo demonstrou correlaçäo entre ambos os médicos para o isolamento do vírus rábico. No entretanto, o teste de hipótese - aplicado para verificar a endemicidade da regiäo - mostrou que o método alternativo (célula McCoy) foi mais eficaz para discriminar a presença do vírus rábico, bem como para estabelecer a possibilidade de a regiäo näo estar livre de doença